Беҳтарин омилҳои мудохила дар аксуламалҳои PCR

Ҳангоми муносибати PCR, баъзе омилҳои дахолаткунанда аксар вақт дучор меоянд.
Аз сабаби ҳассосияти хеле баланди PCR, ифлосшавӣ яке аз омилҳои муҳимтарин ба натиҷаҳои PCR мебошад ва натиҷаҳои бардурӯғ пайдо мешавад.
Асосҳои гуногуни ғайрифаъол мебошанд, ки ба натиҷаҳои бардурӯғ оварда мерасонанд. Агар як ё якчанд қисмҳои муҳими омехтаи PCR ё вокуниши амбизатсия ба худ монеъ ё халал расонида бошад, ба сурати ташхиси ташхис халал расонида метавонад. Ин метавонад боиси коҳиш ёфтани самаранокӣ ва ҳатто натиҷаҳои бардурӯғ оварда расонад.
Илова ба палит, аз байн бурдани беайти кислотаи ядроӣ аз сабаби интиқол ва / ё шароити нигоҳдорӣ пеш аз таҳияи намуна рух медиҳад. Аз ҷумла, ҳарорати баланд ё нигоҳдории нокифоя метавонад ба харобшавии ҳуҷайраҳо ва кислотаҳои нуксионӣ оварда расонад. Тасвири ҳуҷайра ва матоъ ва воридшавии парафин сабабҳои маъруфанд, ки сабабҳои машҳури ДНК ва мушкилоти доимӣ (ба рақамҳои 1 ва 2). Дар ин ҳолатҳо, ҳатто ҷудокунии оптималӣ ва тозагӣ кӯмак нахоҳад кард.

Тасвири 1 | Таъсири имзои бепоёни ДНК
Электрории Агарроза нишон дод, ки сифати ДНК аз бахшҳои парафин ба таври автоматӣ фарқ мекарданд. ДНК дар бораи дарозии миёнаи пораҳои гуногун дар иқтибосҳо вобаста ба усули ислоҳкунӣ мавҷуд буд. ДНК танҳо вақте ки дар намунаҳои яхкардашудаи маҳаллӣ ва дар расмиёти бетарафи буферӣ гузошта шудааст, нигоҳ дошт. Истифодаи як ё бенуқсон, кислотаи қиёсии контеӣ, кислотаи формулти дорои миқдори зиёди кислота буд, ба талафоти назарраси ДНК оварда расонид. Фраксия боқимонда хеле тақсим шудааст.
Дар тарафи чап дарозии порчаҳо дар ҷуфтҳои килборвикӣ (KBP)

Тасвири 2 | Талафоти ҳадафи кислотаи нукфӣ
(a) фарқияти 3'-5-5 'Тафовут ба ҳарду ришва ба танаффус дар ДНКАЗИД. синтези ДНК дар пораҳои хурд ба амал хоҳад омад. Аммо, агар сайти ҷасурии насл дар порчаи ДНК мавҷуд набошад, танҳо ампипи хатӣ рух медиҳад. Дар парвандаи мусоид, порчаҳо метавонанд якдигарро барқарор кунанд, аммо ҳосилнокӣ сатҳи хурд ва камтар аз муайян хоҳад буд.
(б) Аз даст додани пойгоҳҳо, асосан аз сабаби ташаккули депожнаст ва Тимимидинӣ боиси кам шудани шумораи H-вомбаргҳо ва кам шудани тм мегардад. Дар марҳилаи гармшавии дарозмуддат, дастурҳо аз матритса гна мешаванд ва ҳатто дар шароити камтар дағалона ҷашн мегиранд.
(в) Асосҳои ҳамшафати turne-ро ташкил медиҳанд.
Боз як мушкили маъмуле, ки аксар вақт дар ташхиси молекулавӣ рух медиҳад, ки то ба истихроҷи макол-хлофилмалӣ ба истихроҷи маколу хлерии ҳадаф табдил ёфтааст. Дар ҳолатҳои шадид, ин метавонад бо манфии бардурӯғ алоқаманд бошад. Вақти зиёдро бо лизоки ҷӯшон ё ҳозимаи фасодпарастии партовҳои яроқ ҳифз кардан мумкин аст, аммо ин усул аксар вақт ба ҳассосияти ками PCR аз сабаби нашъоқандаи кислотаи ядроӣ оварда мерасонад.

Дар вақти амбизатсия монеъи фаъолияти полимерз

Умуман, ҷилавгирӣ ҳамчун консепсияи контейнерӣ барои тавсифи ҳама омилҳое, ки ба натиҷаҳои зерқадамоти зерқадамот оварда мерасонанд, истифода мешаванд. Дар як маънои қатъии биохимиявӣ, ҷилавгирӣ аз фаъолияти фермент маҳдуд аст, яъне он гардиши субстратро тавассути ҳамкорӣ бо макони фаъоли ДНК-ро коҳиш медиҳад ё полакти худ, MGACE DNY DNY DNY DNY DNY DNY DNY DNA Polymerase).
Ҷузъҳо дар интихоб ё буферҳои мухталиф, ки реаксияҳо доранд, метавонанд бевосита ба ферментҳо монеъ шаванд ё кофтоҳоро ба даст оранд (масалан EDTA), ба тариқи коҳиш ёфтан ё ба даст овардани натиҷаҳои манфӣ.
Бо вуҷуди ин, бисёр ҷузъҳои ҷузъҳои аксуламал ва кислотаҳои нуксионӣ мавҷуданд, ки кислотаҳои нуксионӣ низ ҳамчун "PCRT ивазкунанда" таъин шудаанд. Пас аз тамом шудани ҳуҷайра бо ҷудошавӣ ва кислотаи ядро ​​вайрон карда мешавад, амалҳои муштарак байни намуна ва ҳалли он ба амал омадааст. Масалан, "Scavengers 'метавонад тавассути муоширати ғайритобакӣ ё дукарата дукарата ё дукарата бо ҷудоӣ ва тозакунӣ тавассути кам кардани шумораи ҳадафҳо, ки дар ниҳоят ба зарфе расад, халал расонад.
Умуман, дар аксари моеъҳои бадан, ки барои санҷишҳои ташхиси бадан ва хавфлобин ва геруғлобин ва главин, фарбеҳӣ ва ҷузъҳои муҳити зист мавҷуданд (Phenolfs, металлҳо)

Бештари пешкашшуда метавонад дар бактерияҳо ва ҳуҷайраҳои эҳтиётии эдаревер илова карда шавад, ДНК-мақсадноки мақсадноки Мақрозияи ДНК-ро ё таҷҳизоти лабораторӣ, ба монанди дастпӯшҳо ва пластикӣ. Тоза кардани кислотаҳои анкеинтӣ дар давоми ё пас аз истихроҷ, усули афзалиятнок барои аз байн бурдани палангҳои PCR мебошад.
Имрӯз, таҷҳизоти гуногуни истихроҷшуда метавонанд протоколҳои дастиро иваз кунанд, аммо 100% барқарорсозӣ ва / ё тоза кардани ҳадафҳо ҳеҷ гоҳ ба даст наомадааст. Ингибитортҳои эҳтимолӣ ҳанӯз ҳам дар кислотаҳои нуксионии тозашуда ё шояд эътибор пайдо кардаанд. Стратегияҳои гуногун барои коҳиш додани таъсири монеъишорон вуҷуд доранд. Интихоби полимерзати мувофиқ метавонад таъсири назаррас ба фаъолияти ҷилбидорӣ таъсир расонад. Дигар усулҳои исботшудаи кам кардани ҷилавгирӣ аз polly poly mymerass ё истифодаи иловаҳо ба монанди BSA мебошанд.
Нашрияти аксуламалҳои PCR-ро бо истифодаи назорати сифати дохилии дохилӣ (IPC) нишон додан мумкин аст.
Барои нест кардани ҳама рецитентҳо ва дигар қарорҳо дар маҷмӯаи истихроҷ, ба монанди Этанол, Кетаб, GESTAB, GUSAB, ISOPROPANOL ва Phenol, аз ҳасадҳои гӯшти беақл. Вобаста аз тамаркузи онҳо, онҳо метавонанд PCR-ро фаъол ё монеъ кунанд.